实验室仪器众多。有用来做液体分析的液相色谱仪,也有用来做气体分析的气相色谱仪,还有什么凝胶色谱仪,离子色谱仪等等。那么这么多的仪器,都离不开一样东西。那就是色谱柱。色谱柱有很多种,常规的色谱柱有很多种,每个厂家的叫法都不一样,但是我们可以把它统一称呼为色谱柱。今天就为大家讲一种常用的Fortis C8 色谱柱。
1、首先要确认您所要分析的样品流动相的pH范围是否在您的柱子的pH范围之内,以免损坏柱子硅胶;
2、接下来就是用你做样品的流动相去平衡柱子,如果您的流动相中含有缓冲盐溶液,在平衡柱子之前务必要先用5%的甲醇(乙腈)/水去过渡10倍柱体积以上,再用带盐的流动相去平衡柱子足够的时间,之后方可进样分析;
3、无论您分析何种样品,都会由于各种原因样品中总有部分杂质,因此建议您在进样前在柱子前端加接保护柱以保护您那昂贵的分析柱,或者用0.2um或 0.45um针头过滤器过滤样品后方进样分析!
Fortis C8 色谱柱的清洗:
分两种情况进行:
1、如果您的样品分析只用到一般的甲醇,乙腈和水的流动相(包括流动相里面加了点酸),在做完样品后可直接用65%的乙腈/水或者纯甲醇进行清洗10倍柱体积即可保存;
2、如果您的样品分析用到了含缓冲盐或者酸或者离子对试剂的流动相,在做完样品后的清洗必须按照下列2个步骤进行清洗柱子:
a、重要的步骤——用5%的乙腈(甲醇)/水,清洗20倍柱体积溶剂以上,1~2ml/min(根据时间自由调节流速:如果因为时间来不及而清洗不了那么长时间,可以适当加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子应以0.2~0.5ml/min的流速进行),
b、65~90%的乙腈(甲醇)/水或者纯甲醇/乙腈,清洗5~10倍柱体积,1~2ml/min。