SVEA C18液相色谱柱是一种常用的反相色谱柱,它以十八烷基硅烷键合硅胶为填料,因此有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力,适用范围较广,是高效液相色谱仪分析中shou选的色谱柱类型。
SVEA C18液相色谱柱的样品制备:
1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外,如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。
2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成,会加速降低柱效。
3、色谱柱由高压匀浆法装填,能承受较高压力。为获得*分离效果,使用时请不要超过200kgf,而且避免压力突然上升或变化,否则会造成硅胶填料的破坏,减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外zui高操作温度不要超过60℃。
1、对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中。
2、具有一定惰性,与样品不产生化学反应。
3、黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命。
4、物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
5、沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。
6、在配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止微量氧与样品发生作用。
SVEA C18液相色谱柱的保存操作:
1、如果流动相含有酸或无机盐,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。
2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低。