SVEA Cyano液相色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照液相色谱柱出厂报告中的条件进行，只有这样，测得的结果才有可比性。

 

　　1.样品的前处理：

　　①最好使用流动相溶解样品；

　　②使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质；

　　③使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质；

 

　　2.流动相的配制：

　　液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此，要求流动相具备以下的特点：

　　①流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中；

　　②流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应；

　　③流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时，降低柱压降，延长液体泵的使用寿命；

　　④流动相的物化性质要与使用的检测器相适应，如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制；

　　⑤流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行；

　　⑥在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

 

　　3. 流速的选择：

　　因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的SVEA Cyano液相色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的液相色谱柱，流速一般选择1mL/min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8mL/min为佳。当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间。

 

　　4. 流动相使用注意事项：

　　①由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系；

　　②对于正相柱推荐使用沸程为30-60 ℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果；

　　③含水流动相最好在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入NaN3，防止细菌生长；

　　④流动相要求使用0.45μm滤膜过滤，除去微粒杂质；

　　⑤使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长SVEA Cyano液相色谱柱的使用寿命，提高柱性能。