SVEA C18液相色谱柱是怎么进行活化的?具体流程如下
发布日期:2022-09-21 浏览次数:1164
新的SVEA C18液相色谱柱活化,实际上是一个平衡的过程,活化之前必须查看包装内配套说明书,并按说明书上方式,与供应商核实SVEA C18液相色谱柱内保存溶剂及推荐活化步骤,若无推荐步骤可参考如下活化步骤:
1.反相柱活化流程:
①甲醇或乙腈冲洗20倍柱体积;
②若流动相含有缓冲盐,用跟流动相中盐相等比例的超纯水和有机相冲洗过渡,用量为20倍柱体积,再用含缓冲盐的流动相平衡SVEA C18液相色谱柱,用量为20倍柱体积或以上;
③若流动相不含缓冲盐,用流动相平衡SVEA C18液相色谱柱,用量为20倍柱体积或以上;
④最终到压力基线平稳,若不平稳可延长平衡时间。
2.正相柱活化流程:
①保存溶剂为正相溶剂时:
若使用正相溶剂做流动相,可用正相流动相冲洗20倍体积。一般先用异丙醇冲洗50倍体积,可用0.2mL/min流速,再用流动相(乙腈/水)平衡50倍体积。
②保存溶剂为反相体系时:
若使用反相体系做流动相,使用反相溶剂冲洗20倍体积后即可使用。若使用正相体系做流动相先用异丙醇冲洗50倍体积,可用0.2mL/min流速,再用正相流动相平衡50倍体积。